Desarrollo embrionario y biopsia

Avanzado

ADNmt en el embrión antes de la implantación

El embrión hereda del ovocito su conjunto de ADNmt. Hasta el estadio de blastocisto, la replicación del ADNmt está suprimida, por lo que, con cada división celular, el ADNmt existente se distribuye entre las células hijas y su contenido por célula se reduce aproximadamente a la mitad (Rubens et al., 2025). La reanudación de la replicación y la regulación del número de copias al diferenciarse los linajes celulares están estrechamente relacionadas con la pluripotencia (Facucho-Oliveira & St John, 2009). Si las moléculas se distribuyeran de forma muy desigual, el embrión tendría su propio «cuello de botella»; por ello, la representatividad de la muestra de biopsia debe comprobarse experimentalmente (Rubens et al., 2025).

Evidencia del estadio de segmentación

• Monnot y colaboradores estudiaron 70 blastómeros individuales de embriones de dos portadoras de m.3243A>G: la diferencia máxima entre blastómeros de un embrión fue de 6 p. p., con un coeficiente de correlación intraclase de 0,994; el nivel medido en dos blastómeros del día 3 difirió del del embrión completo del día 5 en menos de 7 p. p. en 13 de 16 embriones y en 10–15 p. p. en los otros tres (Monnot et al., 2011).
• Sallevelt y colaboradores encontraron, entre 294 blastómeros de 73 embriones de 9 portadoras de m.3243A>G (valor de corte del 15 %), solo un resultado potencialmente falso negativo (0,34 %) y ningún falso positivo; recomendaron un protocolo de un solo blastómero, señalando que la biopsia de dos blastómeros reduce la tasa de nacimiento vivo (Sallevelt et al., 2017a).
• Para m.14487T>C, Sallevelt y colaboradores encontraron diferencias de 19,4 y 30,6 p. p. entre blastómeros en 2 de 19 embriones (Sallevelt et al., 2017b).
• Mertens y colaboradores demostraron que, para variantes neutras y raras del ADNmt, los blastómeros individuales del día 3 ya difieren (mosaicismo temprano), mientras que la proporción de variantes potencialmente patogénicas disminuye entre los días 3 y 5 (Mertens et al., 2022).
• Tajima y colaboradores examinaron embriones 3PN de parejas sin una variante conocida: su método detectó un 4–22 % de m.8993T>G, con una dispersión de 2–11 puntos porcentuales entre blastómeros, dentro del error del método (−5 a +6 puntos porcentuales); estos datos no permiten estimar la heterogeneidad biológica (Tajima et al., 2007).

Evidencia del estadio de blastocisto

• Treff y colaboradores: para m.3243A>G, el nivel del TE predijo el de la ICM (r² = 0,97) (Treff et al., 2012).
• Rubens y colaboradores: 112 embriones con variantes patogénicas y 28 controles; las variantes se distribuyeron uniformemente entre blastómeros del día 4 y entre partes del blastocisto, y los niveles permanecieron estables de la segmentación al blastocisto; sin embargo, en 1 de 8 embriones de control, algunas células TE individuales diferían considerablemente (Rubens et al., 2025).
• Tofilo y colaboradores: seis blastocistos de una portadora de m.14487T>C con una distribución bimodal; tras la desvitrificación y la división en partes, los valores del TE restante y de la ICM concordaron estrechamente con los de la biopsia original (Tofilo et al., 2026).
• Hu y colaboradores: un blastocisto con un 17,8 % de m.3250T>C en la biopsia se dividió en 16 muestras de 3–5 células; los valores oscilaron entre el 14,7 % y el 21,9 %, con una media del 18,2 %: los resultados de las muestras celulares pequeñas fueron más variables, pero su media concordó con el resultado de la biopsia (Hu et al., 2026).
• Los enfoques de genoma completo permiten realizar distintas formas de PGT, incluida la evaluación del ADNmt, en una sola biopsia (Janssen et al., 2024).

Variabilidad intraembrionaria en cifras

La sección Dentro de un mismo embrión reúne mediciones pareadas de la biopsia del TE, la ICM y el TE restante, así como pares de blastómeros. La dispersión dentro de un embrión suele ser un orden de magnitud menor que entre embriones. Consecuencia práctica: una diferencia de unos pocos puntos porcentuales no cambia la decisión para embriones con valores extremos, pero puede situar un embrión al otro lado del valor de corte elegido si el nivel medido está próximo a él.

Limitaciones de los métodos de microdisección embrionaria

El material celular se aísla después de la descongelación, generalmente de embriones no aptos para uso clínico. Las células residuales, los restos celulares y el material bajo la zona pelúcida no pueden equipararse a los linajes celulares que forman los tejidos fetales; la ICM de un blastocisto todavía no es el epiblasto (Tofilo et al., 2026). Por tanto, las comparaciones del TE con la ICM y del TE con el TE restante deben considerarse por separado, y las muestras de los estudios siguen siendo pequeñas, con representación desigual de las variantes del ADNmt.

La biopsia como intervención

La biopsia es un procedimiento invasivo y sus parámetros (estadio, número de células, apertura de la zona pelúcida, cultivo y criopreservación) son definidos y validados por cada clínica y laboratorio. No existe un protocolo universal para PGT-mt; las recomendaciones publicadas se refieren al número mínimo de células del TE para una estimación fiable de la heteroplasmia (Rubens et al., 2025) y a la elección entre uno y dos blastómeros (Sallevelt et al., 2017a).

Esta descripción de los estadios y de la biopsia es educativa. No es un protocolo de laboratorio ni define parámetros de biopsia.